Charakterisierung des Adapterproteins FAM159B

FAM159B ist ein bisher nur wenig untersuchtes Adapterprotein mit unbekannter Funktion. Die verfügbare Literatur beschreibt eine Expression im Pankreas und in den neuroendokrinen Zellen des Magens. Das Protein soll in der Zellmembran und im Zytosol lokalisiert sein. Es wird eine Rolle bei der Regulation der β-Zell-Exozytose vermutet. Ziel der vorliegenden Arbeit war die ausführliche Charakterisierung der Expression von FAM159B in verschiedenen Zelllinien, normalen und neoplastischen humanen Geweben sowie in Geweben unterschiedlicher Tierspezies. Zur Beantwortung der Fragestellungen dienten immunhistochemische, immuncytochemische und Western-Blot-Analysen. Die Immunhistochemie ermöglicht eine spezifische Lokalisation des Antigens in Zellen und Geweben. Immuncytochemische Untersuchungen erlauben eine Charakterisierung der subzellulären Expression. Western-Blot-Analysen ermöglichen eine Größenbestimmung und durch Co-Immunpräzipitation einen direkten Nachweis einer Assoziation zweier Proteine. Der genutzte Anti-FAM159B Antikörper konnte in Manuskript 1 hinsichtlich seiner Spezifität in immunhistochemischen, immuncytochemischen und Western-Blot-Analysen erfolgreich charakterisiert werden. In den verschiedenen untersuchten menschlichen Normalgeweben und Tumoren konnte eine starke FAM159B-Expression in endokrinen, neuroendokrinen und neuronalen Geweben verzeichnet werden. Die Untersuchungen in Manuskript 2 ergaben eine zytosolische FAM159B-Expression in BON-1, PC-3, OH-1 und NCI-h82-Zellen. Doppelfärbungen zeigten eine Co-Expression mit verschiedenen, für neuroendokrine Zellen typischen Markern und Rezeptoren. Der Speziesvergleich in Manuskript 3 ergab eindeutige Unterschiede in der FAM159B-Expression im Pankreas. Mit der vorliegenden Arbeit konnte das Wissen über FAM159B signifikant erweitert werden. Die Ergebnisse der Arbeit bieten eine breite Grundlage und viele Ansatzpunkte für zukünftige Forschungsvorhaben zur Aufklärung der Funktion von FAM159B.