Seneszenz und inflammatorischer Phänotyp Fett-abgeleiteter Stammzellen (ASC) junger und alter Spender und deren Wirkung auf Tumorwachstum und Angiogenese : in vitro

Um altersabhängige Auswirkungen zu untersuchen, wurden die ASC von jungen (ASCj, 20-35 Jahre) und alten (ASCa, >65 Jahre) Spendern untersucht. Dabei wurde der Einfluss von oxidativem Stress durch Hydroxyurea und die Modulation durch die antioxidativ wirkenden Substanzen Metformin und Resveratrol analysiert. Die Messgrößen umfassten ROS-Gehalt sowie die Expression von Seneszenzmarkern wie der SA-ß-Galactosidase-Aktivität und p21Waf1/Cip1-Expression, die mittels qPCR und Western Blot bestimmt wurden. Zur Charakterisierung des inflammatorischen Phänotyps wurden anti- und pro-inflammatorische Zytokine mittels qPCR und ELISA analysiert. Des Weiteren wurde der mögliche Einfluss des Spenderalters und des Seneszenzstatus auf die Interaktion mit Multizellulären Tumorsphäroiden (MCTS) in Kokulturmodellen in-vitro untersucht. Dabei wurde die Proliferation mittels Größenmessung und Ki67-Färbung und die Vaskulogenese/ Angiogenese mittels Immunhistochemie und Endothelmarkern beurteilt. Die Ergebnisse bestätigten eine Korrelation zwischen dem Spenderalter, dem ROS-Gehalt und den Seneszenzmarkern. ASC, die mit Hydroxyurea behandelt wurden, wiesen einen erhöhten ROS-Gehalt und eine verstärkte Expression von Seneszenzmarkern auf. Eine Metformin-Behandlung führte zu einer Reduktion des ROS-Gehalts und könnte potenziell zur Regeneration von Zellen unter oxidativem Stress beitragen. Es wurde eine altersabhängige Abnahme der Zytokin-Produktion festgestellt. In den Kokulturen konnten keine signifikanten Ergebnisse hinsichtlich des inflammatorischen Phänotyps und der Proliferation gezeigt werden. Jedoch zeigten sich Tendenzen, dass Hydroxyurea die Proliferation förderte und Metformin sie senkte. Eine frühe endotheliale Differenzierung wurde durch die Endothelmarker FLK-1 und vWF immunhistochemisch nachgewiesen.