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Schwingungsspektroskopische Untersuchungen zu zellulären Altersprozessen von humanen Fibroblastzellen

Um die Gesundheit bis ins hohe Alter zu gewährleisten, sind die alternsassoziierten Fehlfunktionen und Erkrankungen von Interesse. Ziel der Alternsforschung ist es, diese Mechanismen zu identifizieren und Ansatzpunkte zu gewinnen, die den Zustand des „gesunden“ Alterns verlängern können. Humane Zellen…

Klonierung und in vivo Analyse von Proteinen des menschlichen inneren Kinetochors

Die korrekte Trennung der Schwesterchromatiden während der Mitose ist unumgänglich für die Stabilität des Genoms und somit ein Grundpfeiler des Lebens. Um diese Herausforderung zu bewältigen, besitzt jedes Chromosom an der primären Einschnürungsstelle einen Proteinkomplex, das Kinetochor, welches die…

Assessment of structural diversity of ß-amyloid with genetically engineered antibody fragments

Several antibodies targeting β-amyloid (Aβ) conformers have been studied so far, but the mechanism of their action is still poorly understood. I described several VHH antibody domains, selected with the use of a camelid antibody library. Using various biophysical (e.g., electron microscopy, surface plasmon…

Molekulares Imaging (MALDI-IMS) humaner Kopf-Hals-Tumore und funktionelle Analyse pathologisch exprimierter Proteine am Beispiel…

Mit Hilfe der Matrix assisted laser desorption/ionization (MALDI) imaging mass spectrometry (IMS) ist es möglich, das molekulare Profil eines Gewebes direkt auf der Probe zu erstellen. Dabei kann die Verteilung von hunderten unbekannten Analyten im Gewebe mit einer einzigen Messung bestimmt werden, während…

Charakterisierung der amyloidspezifischen Antikörperdomäne B10

Die Bildung von Amyloidfibrillen ist eine intrinsische Eigenschaft von Polypeptidketten. Das Auftreten von Amyloidfibrillen ist mit einer Reihe schwerwiegender Krankheiten verbunden, wie beispielsweise der Alzheimer-Krankheit oder Diabetes mellitus Typ 2. Die klinische Diagnose von Amyloidosen und die…

Untersuchung externer und intrazellulärer Faktoren und Mechanismen auf den Bildungsprozess von Aβ-Amyloid

Die Amyloidosen stellen eine Gruppe degenerativer Krankheiten dar, die durch organ- oder gewebetypische Proteinablagerungen charakterisiert sind, welche zu Schädigungen des Gewebes führen. Morbus Alzheimer ist eine zerebrale Amyloidose, die im hohen Alter vermehrt auftritt und mit starker Demenz einhergeht.…

Funktionelle Untersuchungen der beiden Alien-Isoformen Alienα und CSN2

In dieser Arbeit konnten anhand eines Interaktionsassays Proteine der allgemeinen Transkriptionsinitiation und DNA-Reparatur, wie p33ING, als Interaktionspartner von Alien beschrieben werden. Des Weiteren wurde der Einfluss von Alien auf das Ubiquitin / Proteasom-System untersucht. Dabei konnte zum ersten…

Funktionelle Untersuchungen zur Beteiligung von S100A11 an der DNA-Schadensreparatur und Zellzyklusregulation

S100A11, ein Mitglied der S100-Proteinfamilie, ist an der räumlichen und zeitlichen Verteilung von Ca2+ sowie an der Weiterleitung des intrazellulären Ca2+-Signals beteiligt. Zahlreiche Studien weisen auf eine wichtige Rolle im Prozess des Zellwachstums, der Differenzierung und Zellbeweglichkeit sowie…

Proteomische Identifizierung und Charakterisierung Tumor-spezifischer Biomarker

In der vorliegenden kumulativen Habilitationsschrift wurde durch den Einsatz einer technischen Triade, die Gewebemikrodissektion, SELDI-Massenspektrometrie und Immunhistochemie beinhaltet, die Identifizierung potentielle Tumormarker-Kandidaten aus verschiedenen Tumorentitäten beschrieben. Das Auftreten…

Systems biology of mitosis

In mitosis, `surveillance control mechanisms' regulate transitions across the several stages of cell division. The so called `Mitotic-Spindle-Assembly-Checkpoint (MSAC)' and `Exit-From-Mitosis (EFM)' are examples of such mechanisms. MSAC ensures the correct segregation of chromosomes by preventing…

Das multifunktionelle Signalprotein Topoisomerase IIß-Bindeprotein 1 (TopBP1) und seine Funktion in der DNA-Schadenserkennung…

Das multifunktionelle Signalprotein TopBP1 ist in verschiedene zelluläre Prozesse eingebunden. In dieser Arbeit wird seine Funktion in der DNA-Schadenserkennung und Replikation näher beleuchtet. Zwei Interaktionen und deren funktionelle Bedeutung werden charakterisiert. Es handelt sich zum einen um die…

Stochastic effects in a compartmental model for mitotic checkpoint regulation

Summary The proper segregation of sister chromatids at onset of anaphase is surveyed by the mitotic spindle assembly checkpoint. The concentration dynamics of the complexes APC:Cdc20 and MCC:APC determine exit from metaphase to anaphase. We have developed a model based on 14 proteins and complexes to…
Berlin: De Gruyter, 2007-12-01

Duale Optimierung der Darstellung heterologer Proteine in Escherichia coli : Parallele und differenzielle Produktion von…

In der Postgenom-Ära ist die Aufklärung der Funktion einzelner,Proteine bzw. komplexer Proteinstrukturen von grundlegender Bedeutung für das Verständnis molekularer Regulationsmechanismen zellulärer Signalwege und insbesondere in der Pathogenese vieler Krankheiten. Auf Grund der limitierten Anzahl an…

Fluoreszenz in situ Hybridisierung an dreidimensional erhaltenen Interphasekernen

Ziel der vorliegenden Arbeit war es, eine Methode zu entwickeln und zu etablieren, mit der es möglich ist, Interphasezellkerne dreidimensional zu erhalten und chromosomale Strukturen mittels Fluoreszenz in situ Hybridisierung (FISH) zu färben. Aus unterschiedlichen methodischen Ansätzen entstanden zwei…

Contribution to the characterization of human kinetochore proteins CENP-C and hMis12 in vitro and in vivo

The human kinetochore assembly process is involving several proteins and molecules including DNA. However, the assembly mechanism and the exact positions of kinetochore proteins are still poorly understood. Previous report hypothesized that CENP-C localized on the surface of inner kinetochore protein…

Analysen zur Assemblierung von Centromeren und PML-Kernkörperchen in lebenden Zellen

Essenzielle Funktionen im eukaryotischen Zellkern wie RNA-Transkription, DNA-Replikation und DNA-Reparatur werden von makromolekularen Proteinkomplexen bewerkstelligt. Ziel der vorliegenden Arbeit war es, neue Einblicke in die Formation und Funktion von zwei sehr unterschiedlichen Mutiproteinkomplexen…

Charakterisierung der chromosomalen Bandenaufspaltung an den humanen Chromosomen 5, 6, 18, 19, 20 und X

Die Humanzytogenetik, die sich als eigenständige Forschungs-richtung innerhalb der Humangenetik etabliert hat, befasst sich mit der Darstellung und Analyse der menschlichen Chromosomen. Zytogenetische Aufarbeitungsmethoden, sowie eine Vielzahl von Bänderungsmethoden prägten das heutige Verständnis vom…

Towards the architecture of the human inner kinetochore

Im Rahmen der Dissertation „Towards the architecture of the human inner kinetochore“ wurden Proteininteraktionen im humanen inneren Kinetochor untersucht. Dazu wurden die fluoreszenzmarkierten Kinetochorproteine CENP-A, CENP-B, CENP-C, CENP-I und Histone H1, H2A, H3 und H4 mittels AB-FRET (acceptor bleaching-fluorescence…

Nachweis methylierter chromosomaler Regionen mit methylspezifischer Fluoreszenz in situ Hybridisierung

Ziel dieser Arbeit war die Etablierung eines Verfahrens zur Analyse methylierter chromosomaler Bereiche. Durch die Kombination von Natriumbisulfitreaktion und Fluoreszenz in situ Hybridisierung (FISH) konnten reproduzierbare Muster von methylierten Regionen im Genom gesunder Probanden beschrieben werden.…

Entwicklung eines in vitro-Systems zur Prüfung der initialen Plaqueadhärenz an dentalen Biomaterialien

Die Plaquebildung auf dentalen Biomaterialien stellt ein klassisches bakterielles Biofilmproblem im medizinischen Bereich dar. Durch die Auswahl geeigneter Dentalmaterialien unter Berücksichtigung oberflächenenergetischer und -topografischer Materialparameter kann die Plaquebildung reduziert werden.…